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液相色谱仪使用注意事项
来源: | 作者:lunanxinke | 发布时间: 2019-09-03 | 1044 次浏览 | 🔊 点击朗读正文 ❚❚ | 分享到:

液相色谱仪使用注意事项
一、流动相

1必须使用HPLC级或相当于该级别的流动相,并要先经0.45µm薄膜过滤。

2过滤后的流动相必须经过充分脱气,以除去其中溶解的气体(如02),如不脱气易产生气泡,增加基线噪声,造成灵敏度下降,甚至无法分析。

3如果管路中使用peek树脂部件,请不要使用下列流动相:

浓硫酸、浓硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亚砜

二、储液器

保持流动相储液器的清洁是保证仪器正常使用的关键。要使用HPLC级的溶剂,对试剂含有缓冲盐及非HPLC级的流动相一定要用0.45µm过滤器除区去其中的微量物质。


三、
氘灯

紫外检测器中的氘灯是有一定使用寿命的。为了节省灯的使用寿命,在暂时不使用时可在不关机的情况下,只把灯关掉(建议:最好在需要关灯4小时以上才关灯,因为频繁的开关灯,同样会缩短灯的使用寿命)。

四、色谱柱

1在柱头加烧结片不锈钢滤片,需要时加保护柱。防止柱头堵塞,影响分析效果。

2当流动相的PH>7要用大粒度同种填料作预柱。

3溶剂的化学腐蚀性不能太强。要避免微粒在柱头沉降。

4为防止高压冲击,泵上的压力限制不宜太高,一般在15~20MPa为宜,在旧柱或梯度洗脱时应稍高些,以避免因上限设置过低而造成正常使用中的中途停机。

5色谱柱长时间不用,存放时,柱内应充满溶剂(甲醇或乙腈),两端封死。


五、
进样阀

1每次使用后,尤其是进样浓度差异比较大的样品时要用专用工具(不是带针头的注射器)冲洗进样阀,冲洗时必须冲洗进样阀两头数次,每次数毫升。以防止无机盐沉积和样品微粒造成阀内部磨损或阻塞以及样品的交叉污染。

2安装进样阀的56出口要与注射器在同一水平线上,以防止虹吸现象的发生,导致进样量的重复性变异。

3要使用专用的液相注射器进样,注射器前应用专用的样品过滤器。

六、高压泵

1不允许在没有流动相的或流动相还没有进入泵头的情况下启动泵而造成柱塞杆的干磨。

2每天使用后应将整个系统管路中的缓冲液体冲洗干净,防止盐沉积,整个管路要浸在无缓冲的溶液或有机溶剂中。

3长期不用也要定期开泵冲洗整个管路。要用HPLC级试剂输液管前端要用烧结不锈钢沉子过滤流动相。要注意防止管路阻塞造成压力过高而损坏仪器。

4压力下限应设置在0.5~1MPa,以防止储液器中的流动相被抽干或严重渗漏而引起柱塞的干磨有柱后清洗功能的高压恒流泵还要注意保持清洗液,否则将失去柱后清洗效果。